Fissaidee 3
5. I polimorfismi della lunghezza dei frammenti di restrizione: RFLP
Il DNA amplificato contenente centinaia di migliaia di copie del tratto di DNA di interesse, può essere usato ad esempio per identificare polimorfismi genetici denominati RFLP (polimorfismi della lunghezza dei frammenti di restrizione). La tecnica utilizza enzimi di restrizione che tagliano esclusivamente in corrispondenza di specifiche sequenze e una mutazione (un polimorfismo genetico) può far sparire un sito di restrizione per un dato enzima oppure può farlo comparire. In ogni caso nell’analisi dei campioni su un gel di agarosio si può osservare un pattern di restrizione che risulta diverso nella lunghezza dei frammenti generati dalla restrizione tra i campioni che presentano la mutazione e quelli che non la presentano.
Una mutazione che fa scomparire un sito di restrizione determina la riduzione del numero dei frammenti di DNA ottenibili con una reazione di restrizione. Se invece la mutazione fa comparire un sito di restrizione, il numero di segmenti di DNA ottenibili con una reazione di restrizione aumenta.
